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核酸蛋白檢測(cè)儀的發(fā)展與性能
日期：2024-09-02 20:06
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摘要：
層析分離技術(shù)是我國(guó)高?！渡治鰧?shí)驗(yàn)》中的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)。 70 年代后期國(guó)內(nèi)研制的“核酸蛋白檢查儀”，使用某一波長(zhǎng) (280nm 或 254nm 等 ) 進(jìn)行定性檢查分離，用記錄儀描譜，長(zhǎng)期在高校實(shí)驗(yàn)室使用。在我國(guó)科技人員努力下，近年來(lái)，市場(chǎng)上相繼出現(xiàn)了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦核酸蛋白檢查儀”、“雙波長(zhǎng)電腦核酸蛋白檢查儀”、“層析 - 電導(dǎo)聯(lián)用系統(tǒng)”等產(chǎn)品，迅速應(yīng)用到教學(xué)實(shí)驗(yàn)、科學(xué)研究和**生產(chǎn)領(lǐng)域。
一、檢查原理
所有紫外吸收檢查器工作原理都是基于光的吸收定律 --- 朗伯 - 比耳定律。該定律指出，當(dāng)一束單色光 ( λ ) 輻射通過(guò)稀濃度物質(zhì)溶液時(shí)，如果溶劑不吸收光，則液體的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度和光經(jīng)過(guò)溶液的距離成正比。其關(guān)系式為：
A( λ )=a( λ )bc
A=-LgT=Lg1/T
二、層析裝置分類：
按描譜方式分有：記錄儀描譜和電腦描譜 ( 外加采集分析器 )
按檢查波長(zhǎng)分有：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)檢查和雙波長(zhǎng) ( 多波長(zhǎng) ) 同步檢查
按檢驗(yàn)器分有：核酸蛋白檢查和核酸蛋白檢查、電導(dǎo)檢查聯(lián)用
三 . 傳統(tǒng)檢查儀：
傳統(tǒng)層析實(shí)驗(yàn)裝置由單波長(zhǎng)核酸蛋白檢查儀 ( 外加電腦采集器或?qū)㈦娔X采集器裝入檢查儀中也屬此類 ) 、層析柱、恒流泵、部分收集器和記錄儀等部件構(gòu)成。 數(shù)顯超聲波測(cè)厚儀 用一種波長(zhǎng) ( 如 280nm 或 254nm 等 ) 下對(duì)已知物質(zhì) ( 蛋白或核酸等 ) 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢查，高校實(shí)驗(yàn)室的層析實(shí)驗(yàn)裝置大多屬于此類。特點(diǎn)如下：
1 、檢查前必須選定一種波長(zhǎng) (280nm 、 254nm) 進(jìn)行檢查，利用物質(zhì)特征波長(zhǎng)分離已知組分。
2 、要求學(xué)生在檢查前一定要先調(diào)整透過(guò)率為 100% ，然后再調(diào)整吸光度為 0 。學(xué)生經(jīng)常會(huì)問(wèn)：雖然透過(guò)率和吸光度在此點(diǎn) (T=100% ， A=0) 符合了 A=lg(1/T) 關(guān)系，但怎樣保證在量測(cè)范圍內(nèi)都符合朗伯 -- 比爾定律 ?
3 、傳統(tǒng)檢查儀為保證量測(cè)讀數(shù)落在儀器有效量測(cè)范圍內(nèi)，在儀器面板上都設(shè)有靈敏度選擇裝置 ( 2.0A 、 1.0A 、 0.5A 、 0.2A 、 0.1A 、 0.05A 等 ) 。因此，量測(cè)前要選擇合適的靈敏度 ; ②真正吸光度值是儀器顯示數(shù)與靈敏度的乘積 ; ③量測(cè)中不要改變靈敏度， 數(shù)顯超聲波測(cè)厚儀 否則可能會(huì)帶來(lái)基線變化。
4 、傳統(tǒng)檢查儀在不同靈敏下的量測(cè)結(jié)果均為 0-10mv 直流信號(hào)，將此信號(hào)輸出到記錄儀或電腦采集器。顯然，記錄紙或電腦屏上的吸光度也并非樣品實(shí)際的吸光度，也應(yīng)受到儀器靈敏度的調(diào)制。
四、新型檢查儀
以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢查、分離和純化為目的，新型層析實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的電腦核酸蛋白檢查系統(tǒng)具有以下特點(diǎn)：
1 、系統(tǒng)智能調(diào)整吸光度到 0.000 ，透光率到 100% 。，并在量測(cè)范圍內(nèi)的吸光度和透過(guò)率嚴(yán)格符合 A=Lg(1/T) 。
2 、單波長(zhǎng)檢查或雙波長(zhǎng)同步檢查。
3 、系統(tǒng)自帶數(shù)據(jù)采集工作站，檢查、采集、軟件工作站一體化系統(tǒng)集成。分析軟件具有實(shí)時(shí)描譜、分析參數(shù)、圖譜保存、圖譜打印、圖譜編輯等功能，提供峰高、峰寬、峰面積、歸一化、保留時(shí)間、半峰寬、峰底寬、面積含量、純度、層析柱分辯率等參數(shù)。
一、檢查原理
所有紫外吸收檢查器工作原理都是基于光的吸收定律 --- 朗伯 - 比耳定律。該定律指出，當(dāng)一束單色光 ( λ ) 輻射通過(guò)稀濃度物質(zhì)溶液時(shí)，如果溶劑不吸收光，則液體的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度和光經(jīng)過(guò)溶液的距離成正比。其關(guān)系式為：
A( λ )=a( λ )bc
A=-LgT=Lg1/T
二、層析裝置分類：
按描譜方式分有：記錄儀描譜和電腦描譜 ( 外加采集分析器 )
按檢查波長(zhǎng)分有：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)檢查和雙波長(zhǎng) ( 多波長(zhǎng) ) 同步檢查
按檢驗(yàn)器分有：核酸蛋白檢查和核酸蛋白檢查、電導(dǎo)檢查聯(lián)用
三 . 傳統(tǒng)檢查儀：
傳統(tǒng)層析實(shí)驗(yàn)裝置由單波長(zhǎng)核酸蛋白檢查儀 ( 外加電腦采集器或?qū)㈦娔X采集器裝入檢查儀中也屬此類 ) 、層析柱、恒流泵、部分收集器和記錄儀等部件構(gòu)成。 數(shù)顯超聲波測(cè)厚儀 用一種波長(zhǎng) ( 如 280nm 或 254nm 等 ) 下對(duì)已知物質(zhì) ( 蛋白或核酸等 ) 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢查，高校實(shí)驗(yàn)室的層析實(shí)驗(yàn)裝置大多屬于此類。特點(diǎn)如下：
1 、檢查前必須選定一種波長(zhǎng) (280nm 、 254nm) 進(jìn)行檢查，利用物質(zhì)特征波長(zhǎng)分離已知組分。
2 、要求學(xué)生在檢查前一定要先調(diào)整透過(guò)率為 100% ，然后再調(diào)整吸光度為 0 。學(xué)生經(jīng)常會(huì)問(wèn)：雖然透過(guò)率和吸光度在此點(diǎn) (T=100% ， A=0) 符合了 A=lg(1/T) 關(guān)系，但怎樣保證在量測(cè)范圍內(nèi)都符合朗伯 -- 比爾定律 ?
3 、傳統(tǒng)檢查儀為保證量測(cè)讀數(shù)落在儀器有效量測(cè)范圍內(nèi)，在儀器面板上都設(shè)有靈敏度選擇裝置 ( 2.0A 、 1.0A 、 0.5A 、 0.2A 、 0.1A 、 0.05A 等 ) 。因此，量測(cè)前要選擇合適的靈敏度 ; ②真正吸光度值是儀器顯示數(shù)與靈敏度的乘積 ; ③量測(cè)中不要改變靈敏度， 數(shù)顯超聲波測(cè)厚儀 否則可能會(huì)帶來(lái)基線變化。
4 、傳統(tǒng)檢查儀在不同靈敏下的量測(cè)結(jié)果均為 0-10mv 直流信號(hào)，將此信號(hào)輸出到記錄儀或電腦采集器。顯然，記錄紙或電腦屏上的吸光度也并非樣品實(shí)際的吸光度，也應(yīng)受到儀器靈敏度的調(diào)制。
四、新型檢查儀
以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢查、分離和純化為目的，新型層析實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的電腦核酸蛋白檢查系統(tǒng)具有以下特點(diǎn)：
1 、系統(tǒng)智能調(diào)整吸光度到 0.000 ，透光率到 100% 。，并在量測(cè)范圍內(nèi)的吸光度和透過(guò)率嚴(yán)格符合 A=Lg(1/T) 。
2 、單波長(zhǎng)檢查或雙波長(zhǎng)同步檢查。
3 、系統(tǒng)自帶數(shù)據(jù)采集工作站，檢查、采集、軟件工作站一體化系統(tǒng)集成。分析軟件具有實(shí)時(shí)描譜、分析參數(shù)、圖譜保存、圖譜打印、圖譜編輯等功能，提供峰高、峰寬、峰面積、歸一化、保留時(shí)間、半峰寬、峰底寬、面積含量、純度、層析柱分辯率等參數(shù)。
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