在實驗室如何取得提取RNA(材料任選)

植物病毒的RNA提?。?
大多植物病毒RNA為單鏈RNA，并且其極性與mRNA極性相同，植物病毒RNA提取較為簡單，一般使用酚氯仿即可獲得滿意結(jié)果。 
  一、材料 
  提純TMV病毒液（10mg/ml）。 
  二、設(shè)備 
  冷凍臺式離心機，低溫真空干燥儀，電泳儀，電泳槽。 
  三、試劑 
  TE-飽和酚:氯仿（1:1），氯仿，3M NaAc(pH5.2)，乙醇(100%和70%)，TE緩沖液，無RNA酶的雙菌水。 
  四、操作步驟 
  1、取一eppendorf管參入提純TMV（10mg/ml)400ml，再參入等體積酚/氯仿，蓋緊管蓋后用手充分振蕩1分鐘，4℃下12000g離心10分鐘。
  2、吸取水相于一新eppendorf管，再用酚/氯仿抽提，直至水相和有機相交界面無蛋白為止。
  3、吸取水相于新eppendorf心管，參入等體積氯仿，用手倒置離心管數(shù)十秒，4℃下12000g離心10分鐘。
  4、取水相，參入1/10倍體積的3mol/L NaAc(pH5.2)，2.5倍體積的冰冷乙醇，混勻，-20℃30分鐘。 
  5、4℃下12000g離心15分鐘，小心棄去上清液，用70%乙醇洗滌沉淀，4℃下12000g離心5分鐘。
  6、小心棄去上清液，沉淀真空干燥5分鐘或空氣干燥10分鐘，并溶于無RNA酶的雙菌水或TE緩沖液中。
  7、取10ml運行電泳分析，另10ml用于cDNA合成。 
  [注意] 1、整個操作應(yīng)盡可能在低溫下運行。 
  2、由于病毒RNA鑲嵌于外殼蛋白里面，因此要充分剝?nèi)ゲ《就鈿さ鞍?，一般需要多次運行酚/氯仿的抽提。